第一篇：鲎的研究综述
鲎的研究综述
摘要：鲎是一种具有重要研究意义和经济价值的海洋动物，也是地球上动物界少数现存珍贵的“活化石”。我国是世界上少数拥有鲎资源的国家，世界上95%的中国鲎资源分布在我国，可以说，我国是中国鲎的真正故乡。现存的鲎在地球上已存活有2亿多年历史，是名符其实的活化石。本文主要介绍鲎特点及保护现状。
关键词：鲎；鲎资源；保护鲎的外形特征
鲎的种属鲎（hou）是栖生于海洋中的一种无脊椎动物，在动物学分类学上，鲎属节肢动物门（Arfhropoda）、肢口纲(Merostomate)、剑尾目(Xiphosura)、鲎科(Patypleidae)。目前，世界上现存的鲎为三属四种，北美洲东岸海域产的美洲鲎，属美洲鲎亚科(Subfamily Limulinae)，东南亚海域产的东方鲎、圆尾鲎、巨鲎均属鲎亚科(Subfamily Tachypleinae)。
鲎的外形酷似一把秦琴，全身分为头胸甲、腹甲、剑 尾3部分。剑尾酷似一把三角刮刀，挥动自如，是鲎的防卫武器。鲎的嘴巴长在头胸甲的中间，嘴边有一对钳子似的小腿，帮助摄取食物,嘴的周围长有10条腿。雌鲎的4条前腿上，长着4把钳子，而雄鲎却是4把钩子。原来雄鲎总是把钩子搭在雌鲎的背上，让雌鲎背着它四处旅行。鲎的胸腹甲交接部长着一片片像桨一样的腹肢，用来游泳，同时也是它的呼吸系统。鲎一旦被逼离开海水，要经过好几天才死，比蟹类有更强的生命力。
鲎有四只眼睛。头胸甲前端有0.5毫米的两只小眼睛，小眼睛对紫外光最敏感，说明这对眼睛只用来感知亮度。在鲎的头胸甲两侧有一对大复眼，每只眼睛是由若干个小眼睛组成。人们发现鲎的复眼有一种侧抑制现象，也就是能使物体的图像更加清晰，这一原理被应用于电视和雷达系统中，提高了电视成像的清晰度和雷达的显示灵敏度。
鲎形似蟹，身体呈青褐色或暗褐色，包被硬质甲壳。身体由头胸部、腹部和剑尾三部分组成。头胸部和腹部均向背面隆起，前面较圆厚，往后趋向扁平，后面延长在剑尾，沿腹部外缘并排着侧缘棘，构成鲎的特殊体形。鲎雌雄异体。以及呈长纺锤形，位于头胸部背甲心区下面的围心腔内；心脏的背面和侧面在8对心孔。暗褐色的鲎，长得像瓢一样。头胸部上顶着一个宽阔的背甲，背凸腹凹，如马蹄形。它有两对眼睛，一对复眼生在头胸甲两侧，一对单眼长于背部前端。头胸部的腹面不分节，有六对附肢，一般如钳状，只有第六对像耙子一样，用来挖土；成年雄体的第二对末端是弯钩状的，以便结 1
尾时抱住雌体。鲎有一个很长很锋利的尾剑，是用来防卫的武器。
幼鲎从拇指大小到成年要15年，雌鲎要蜕壳18次，雄性19次。幼鲎没有尾剑，身体纵分成中央和两侧三个部分，很像三叶虫的幼虫，所以被称作三叶虫幼虫。这也说明鲎与三叶虫有着亲缘关系，是研究动物进化史的珍贵材料。鲎的生活习性
鲎的食性广，以动物为主，经常以底栖和埋木本的小型甲壳动物、小型软体动物、环节动物、星虫、海豆芽等为食，有时也吃一些有机碎屑。鲎类一直作为人类的食物，又是软壳蟹类的天敌。如果是幼体鲎，食物以单胞藻、轮虫、丰年虫幼体、桡足类为主。如果是成体可以食虾和小鱼。鲎有埋沙的习性，用胸甲锐利的后缘插入，将身体慢慢埋入泥沙之中，有时只露出尾巴在外。
丑陋而懒惰的鲎，对“爱情”却很专一，每当春夏季鲎的繁殖季节，雌雄一旦结为夫妻，便形影不离，肥大的雌鲎常驮着瘦小的丈夫蹒跚而行。此时捉到一只鲎，提起来便是一对，故鲎享“海底鴛鴦”之美称。鲎生活在温暖的海洋中，冬季需到较深的海域越冬。每当春末夏初，水温上升时，鲎从深海游向沿岸沙滩，雌雄抱合，在中潮带泥沙中挖穴产卵，受精卵依靠太阳能量孵化，经过5～6周时间，幼虫出膜，称为三叶幼虫。雌鲎一生中要蜕皮18次，雄鲎19次，约15年才能成熟，一旦成熟之后，就不再蜕皮。3 鲎的资源现状及保护
3.1 中国的鲎的资源现状
根据目前掌握的资料已知, 中国海域分布有中国鲎和圆尾鲎 , 是否有南方鲎存在, 有待进一步研究。中国鲎分布于长江口以南的东海和南海海域, 圆尾鲎分布于广东湛江东海岛以南的南海海域。珠江口以北海域仅发现中国鲎成体和少量中国鲎7cm 以下幼体。而在湛江及湛江以南的南海海域, 有大量的中国鲎成体和7cm 以下幼体外, 尚发 现大量7cm 以上的幼体。同时, 湛江及湛江以南的南海海域, 还发现大量圆尾鲎成体和幼体。世纪70 年代以前, 在中国长江口以南的广大海域有大量的中国鲎分布。上海、浙江的杭州湾、舟山群岛、福州、厦门、汕头、香港等地均能采到大量的中国鲎。如在厦门大学, 70 年代以前, 在海边的操场上, 师生们都能捕捉到中国鲎。但随着鲎试剂的开发及鲎甲壳素的利用, 鲎的数量急剧减少。现在, 珠江口以北的海域已很难发现中国鲎, 仅在广东湛江以南的南海海域有大群体的中国鲎和圆尾鲎存在, 但数目也大为减少。
据有关海洋调查报告资料显示, 20 世纪90 年代以前, 整个北部湾, 成熟的鲎个体每年可达 60×104 ~ 70×104 对, 那时在北部湾沿海, 随处都可见 到鲎。但是近二三年已很难再见到这种现象, 北部湾的鲎成熟个体每年已不到30×104 对。目前, 中国的鲎资源主要集中在南海北部的海南、北部湾及粤西一带海域, 占中国总蕴藏量的95% 以上。而中国 的中国鲎资源, 占世界总蕴藏量的95% 以上。中国南海北部这一狭窄海域是中国鲎在地球上的惟一聚集地, 若这一海区的中国鲎消失了, 那么, 地球上就再也找不到中国鲎了。鲎这一珍贵的药用资源, 目前仍在亟剧减少。
3.2 鲎资源的保护
3.2.1 进行鲎种类和资源量调查
目前已知中国海域有 2 种鲎。但有人认为中国有3 种以上的鲎, 即除中国鲎和圆尾鲎外, 尚有南方鲎、黄皮鲎和蓝皮鲎存在, 这有待进一步证实。就中国海域鲎的数量而言, 虽进行过几次相关 的调查, 但都相当不系统, 不能准确说明问题。再加上鲎资源量这几年减少得很快, 有必要进行一次中国海域鲎种类资源和资源量调查。这样才能对中国海域鲎的资源有一个整体而全面的认识, 便于对中国海域鲎资源的管理和保护。
3.2.2 鲎繁殖沙滩的保护
中国海域资源量最大、经济价值最大的鲎是中国鲎。中国鲎必须在沙滩进行产卵繁殖。沙滩的大小、多少及质量对中国鲎的繁殖及成活率有很大的影响。近几年, 南至海南的三亚, 北至长江口的上海, 是我国经济发展最快的地区。大量的填海造陆地, 住房和道路等建 筑设施挤占沙滩, 已造成沙滩面积的大大减少。同时, 工业和人类生活污染已使沙滩的质量大为降低。沙滩变薄, 沙滩泥滩化;工业污染、生活垃圾, 已使沙滩面目全非。中国鲎已很难来这样的沙滩产卵繁殖后代。因为, 这样的沙滩, 即使鲎产了卵, 幼鲎也很难成活。中国鲎失去了沙滩, 就失去了传种接代的机会, 也就必然趋于灭亡。所以, 我们必须保护沙滩, 保护鲎繁殖的场所。
3.2.3 建立鲎资源的持牌捕捞制度
要保护鲎资源, 就必须对现有鲎资源进行计划利用, 杜绝滥捕滥杀。渔业管理 部门根据现有的资源状况, 制定年度最大捕获量, 规定一只鲎一次最大抽血量, 鲎抽血后必须放归大海, 对有条件的单位发放捕鲎牌照, 做到持牌捕鲎。
3.2.4 合理捕捞
保护资源, 并不是说不能捕鲎, 但必须是合理捕捞, 充分发挥鲎的价值。鲎的价值主要体现在成年 鲎上。幼鲎的利用价值低, 捕捞幼鲎对鲎资源的损害大。所以, 管理部
门必须分别对中国鲎和圆尾鲎制定出一个许可 的捕获规格, 有尺寸大小、体重等方面的具体要求, 保证幼鲎不被捕杀, 从而使鲎资源得到正常发展。
3.2.5 建立鲎自然保护区
在鲎相对集中的海区, 及鲎的主要繁殖海域, 建立鲎自然保护区, 保护鲎及鲎的繁殖。只 有这样, 鲎资源才能得到可持续性发展。
3.2.6 进行鲎人工育苗及人工放流
为了保护鲎资源而不去开发它, 这是没有什么价值的。最佳的办法是尽最大价值地开发它, 同时又必须去恢复它, 使它的资源不致减少。就南海而言, 我们现今的任务是: 尽一切努力去开发很有潜力的鲎资源, 同时又尽一切努力使鲎的资源不致减少。大规模人工育苗, 人工放流是目前最理想, 最有战略意义的保护鲎资源的措施。湛江海洋大学实验室已在中国鲎大规模人工育苗方面作了一些工作, 已成功进行了中国鲎的人工授精育苗。
3.2.7进行鲎海洋药物的人工合成鲎是一种重要的药物资源, 鲎的捕杀大部分用于制药, 若这些药能人工合成的活, 就可大大减少鲎的捕获量。如鲎素, 在鲎血细胞里含量相当少, 要提取一定量的鲎素, 就必须捕杀大量的鲎, 若用人工合成, 则不必捕杀鲎, 又能获得大量的药源。
参考文献：
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第二篇：鲎法测定细菌内毒素影响因素的研究进展
鲎法测定细菌内毒素影响因素的研究进展
董培智（山西省药品检验所太原 030001 peizhid@263.net）
鲎试剂法是利用鲎血细胞溶解物（Limulus Amebocyte Lysate, LAL;Tachypleus Amebocyte Lysate,TAL）与微量（pg/ml级）细菌(主要是革兰氏阴性细菌,G-)的内毒素反应,从而检出被检物中内毒素的一种生物体外检测新技术。因为其具有快速、简便、经济、灵敏度高、重现性好、一次可同时测几个样品等优点，自从一九**年美国学者Levin 和 Bang发现此法以来[1]，鲎法正被日益广泛地应用于医药卫生、食品卫生、环境卫生、分子生物学、以及微生物学中。
鲎法大致可分为凝胶法（Gel-colt end point or Gel-colt method,Gelation Assay）、比浊法（Turbridimetric Assay）色原基质法（Chromogenic Substrate method）、以及免疫法（Immunology Assay）等。本文依据文献报道，总结了近年来国内外学者在用这些方法测定细菌内毒素时发现的一些影响因素及其消除方法的研究进展，以供试验者参考。试验条件与操作 培养条件、操作环境可能引起各次实验之间、各实验室之间的结果差异[2]。1.1 时间
鲎试剂在液态时极不稳定, 室温放置太久会影响反应灵敏度，故加样结束后,应立即放入恒温水浴中。[3]延长保温时间，可提高LAL的灵敏度。[4] 有研究者[5]发现细菌内毒素国家标准品和工作标准品的不同混合时间与相对活性之间具有一定的规律，即５分钟时混合点的活性最强，混合时间越长，活性反而降低，但在三十分钟以内的各混合点测定的灵敏度均在规定范围之内。
在显色法中灵敏度与时间有关，故实验过程中既要严格控制每个环节的保温时间，又要严格控制终止时间[2][6][7]。1.2 温度
凝胶试验规定的孵化温度为37℃。但在夏季高温季节，如果同时作几个样，阳性对照不成立的现象时有发生，故应改为冰浴。[3] 郭录平[4]通过实验证明，保温在25-41℃内，随着温度的升高，LAL的灵敏度也随着升高；在41-46℃之间，对灵敏度无明显影响；≥48℃会破坏鲎试剂。
另外在显色法中的灵敏度也与控制温度有关[6][7]。1.3 pH值
高国政等人[8]用动态浊度法详细研究了样品pH 值对细菌内毒素测定的影响，结果发现：样品 pH 在6-8间实验结果稳定；pH ≤3 或≥12时，实验受到抑制，平均回收率≤56.8%。最后得出结论：使用TAL 时，供试品 pH 应预调在6.5-7.5 为好；使用 LAL 时，pH 应预调在6.2±0.1或 6.7-7.8为好。
也有人认为[4][7][9] 鲎试验的 pH 应为6.5-8.5，以7.0-7.5为佳。必要时可用无内毒素的 HCl 或NaOH 调节 pH 值[2]。1.4 试验器具
内毒素稀释不宜用注射器，而应用经过校正的刻度吸管。因为注射器刻度不准，而且,针栓壁磨沙面易吸附内毒素而使其浓度不够,造成凝胶反应不成立[3][10]。
普通玻璃及塑料管也会影响实验结果[2][9]，用硬的玻璃管及AR玻璃管较为合适。一般硼酸玻璃管测得的效价较低,而且LAL的灵敏度愈低，管对测定的结果影响愈大。操作中常用的聚丙烯塑料管可能干扰结果。1.5 操作程序
有实验者发现[3][11]：操作次序也影响试验结果。应该先吸取供试品、然后加入阴性对照及阳性对照液，最后按供试品管、阳性对照管、阴性对照的顺序逐一精确加入鲎试剂。未按此程序容易出现阳性反应不成立的现象。1.6 处理作用
Pedersen MR和Hansen EW[12] 将内毒素溶液用玻璃试管干燥，在氧丙环（Ethylene Oxide，EO）450或900mg/l中暴露1-46小时后，内毒素的LAL活性减少至百分之三十。将多粘菌素B（Polymyxin B，PB）加入到内毒素稀释液中会减少其活性百分之七十五。内毒素经过EO处理会减少LAL活性百分之七十，进一步加入PB会减少LAL的活性百分之九十九。EO对内毒素的反应会减少其LAL活性，也会减少其热源反应，增加与PB的亲和性。
Bamba T[13] 等学者研究了平滑型G-细菌的内毒素（Smooth gram-negative bacteria，S-form)经过高温蒸气处理后的灭活效果，观察到不同种细菌的抗热性显著地不同，减弱率与浓度有关。低浓度（10ng/ml）内毒素处理后的活性可降低至可测定的限度下。粗糙型（Rough strains，R-form)细菌的内毒素减弱时间曲线与个别平滑型相似。平滑型，尤其是Rc突变体（Rc mutant）细菌的内毒素灭活性能够被Mg2+，Ca2+等二价阳离子显著影响。
FDA认为不同的产品处理和储存条件可能会引起对某一样品试验的分析误差。Guilfoyle DE [14]等人通过实验发现培养细菌的培养基以及溶剂的储藏温度均不会引起任何问题。然而，因为溶液在瓶中没有充分震荡，溶剂与橡胶塞接触，约有百分之二十到四十的内毒素丢失。解决此问题的方法是应将试剂直立地存放在无污染的瓶中，并规定在内毒素试验之前统一的混合步骤。
姜素云等[15]通过考察细菌内毒素的稳定性后发现，溶解后的细菌内毒素应用液（0.5-1.0Eu/ml）在0-4 ℃ 放置一周活性不变；1.0-20Eu 应用液若置冰箱，可冷冻保藏20天，但反复冻融活性会逐渐降低。2 供试品 2.1 多糖[2] 我们已经知道每毫升含皮克级的内毒素会使鲎试剂呈阳性，而多于10pg/ml浓度的产碱杆菌多糖（1-3-β-D-葡聚糖）（curdlan，1-3-beta-D-glucan）也会使常规的内毒素实验呈阳性，因为LAL中含G因子[16]。
据报道[17][18]，能激活鲎试剂旁路（G 途径）的物质主要是（1-3）-β-D-葡聚糖（包括（1-4）-β-D-葡聚糖和（1-6）-β-D-葡聚糖）以及LAL-RM（LAL-Reaction Material）两类，如真菌多糖（Fugal polysaccharide）、中空纤维滤膜洗涤液、肾透析仪（人工肾，血液透析仪）洗涤液等。实验室常用的酒精，棉球等也含有较多的（1-3）-β-D-葡聚糖。低于一定浓度的（1-3）-β-D-葡聚糖或LAL-RM不
足以使鲎试剂的凝集反应产生阳性结果，但如果有细菌内毒素共同作用的情况下，凝集反应会变得更为激烈和迅速，很容易使反应出现阳性结果。我国已生产出含有能抑制或阻断鲎试剂G因子旁路反应物质的试剂—增抗液（Antienhancement Solution）。
Cooper JF 和 Weary ME[19] 等学者发现商品的LAL试剂对葡聚糖的反应存在很大的差异，所以实验室间LAL实验的结果可能出现矛盾。动态LAL方法（Kinetic LAL methods）对筛选可能被葡聚糖污染了的物质非常有用。葡聚糖在非口服制剂中不常见，只限于被微生物或纤维素物质污染的产品。并设计了一种能确定葡聚糖存在与否的LAL试验方法。
另外，丹麦科学家[20]发现，细菌内毒素与鲎试剂的凝集反应可被二甲亚砜与多粘菌素B（dimethyl sulfoxide and polymyxin B）合用,或抗鲎C因子的单克隆抗体（monoclonal antibody against Limulus factor C）所抑制。他们还发现β-葡聚糖（beta-glucan）激活途径能完全被昆布糖（laminarin）所阻碍，而不影响内毒素的激活途径。人血浆与LAL反应是通过β-葡聚糖途径激活的，而非内毒素途径。
八十年代后，日本最先研制成功只与内毒素起反应的特异鲎试剂，如：Endospecy，以及只与（1-3）-β-葡聚糖反应的鲎试剂：SLP试剂及Gluspecy。[21] 2.2蛋白
2.2.1阳离子蛋白
几位德国科学家[21]发现阳离子蛋白（Cationic proteins）如溶菌酶、核糖核酸酶A、以及人的免疫球蛋白G（lysozyme, ribonuclease A, and human IgG）能够与细菌内毒素形成细菌内毒素-蛋白复合体，对细菌内毒素有显著的屏蔽作用，从而影响用鲎法来测定细菌内毒素。试验证明，苯酚提取法、稀释加热法、以及高氯酸处理（phenol extraction, dilution heating, and perchloric acid treatment）等方法都不能够解除此作用。胰岛素、糜蛋白酶、链酶蛋白酶（trypsin, chymotrypsin, or pronase）等只能回收10%-20%的内毒素，然而如在测定之前，用蛋白酶 K（proteinase K）来消化样品，可使细菌内毒素的回收率达到百分之百。进一步研究还发现，多聚-L-赖氨酸及多聚二甲亚胺（poly-L-lysine and poly ethyleneimine）作为细菌内毒素选择性配位基能够将细菌内毒素从所研究的蛋白上脱去，从而有利于进一步的测定。2.2.2 血蛋白
Roth R与IKaca W 证明[23][24]，血红蛋白能与LPS结合，这种结合会改变LPS的一些物理特性，从而增强了LPS的生物学活性及LPS与LAL的作用。
据报道[2][17][18]：人血白蛋白、球蛋白、抗凝血酶Ⅲ均可以激活 G因子。有学者的研究表明用一般鲎试剂测定的人血白蛋白、球蛋白等血液制品的阳性检出率明显高于用去G因子LAL测定的阳性率,而后者与兔热源检查结果基本一致。2.2.3 免疫蛋白
Baek L[25] 等人通过免疫电泳方法表明，假单孢绿脓杆菌（Pseudomonas aeruginosa）及金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）细胞膜的一些可溶性抗原（Soluble antigens）与LAL能够反应。
有的学者[26]用鼠单克隆免疫球蛋白M抗体E5（mouse monoclonal IgM antibody E5）来测定其抗不同菌种LPS的活性。结果证明，由于细菌种类不同，经E5处理后，LPS活性减弱的程度也不同，一般地0.2mg/ml以上的E5能减少几乎所有被研究菌种的LPS对鲎试剂的活性。
另据报道 [18], 抗血友病球蛋白、免疫球蛋白也可激活 G 因子途径。2.3 离子
离子对细菌内毒素测定结果影响较大[9]，因为一方面离子强度较大会引起内毒素的聚集，加重低浓度内毒素不易散的问题；另一方面LAL中的C因子必须在二价阳离子的参与下才能被激活形成活化C因子。
Guyomard S;Darbord JC [13][27]介绍了用五种内毒素，即2株大肠杆菌、1株沙门氏杆菌、1株灵杆菌、1株霍乱弧菌（Escherichia coli, Salmonella, Serratia marcescens and Vibrio cholerae)与FDA推荐的内毒素EC5作LAL实验的重现性。发现添加Mg2+增强了LAL显色反应（160mmol/l最佳），而Ca2+浓度大于5mmol/l时抑制了此反应，0.3mmol/l的Zn2+会强烈地抑制反应。由Zn2+的部分抑制作用能被增加Mg2+而减弱（160mmol/l）。当在反应的第一步（细菌内毒素与LAL孵育）时添加这些二价阳离子会改变LAL显色反应，而在反应的第二步，即加入生色底物（chromogenic substrate）时这些阳离子则不会改变LAL生色反应。
据报道[7]当鲎血被抽出后，用3% NaCl 充分稀释(1:500)能阻止变形细胞凝集，即使有内毒素存在也不凝聚，但当有钙或镁离子存在时则很快凝固，由此可知钙、镁离子对于鲎试验的作用，但是过量的钙离子又会影响凝聚作用的完成。因此,当溶液中有EDTA等络合剂或肝素钠、柠檬酸钠等抗凝剂存在时，Ca2+，Mg2+离子将失去作用[2][9]，从而影响本法的测定。
有人在研究内毒素的电催化特性对于鲎试验的影响时，证明钍与铁对内毒素的活性有强烈的影响，但由于其在鲎血中的含量甚微，故并不干扰实际测定。[7] 生理盐水中的 NaCl 对显色反应有干扰[28]，但关键在于稀释样品和标准品须用相同的无热源水或无热源生理盐水。
相反,许多药物中含有的阴离子会吸收鲎试剂中的 Ca2+、Mg2+离子，使实验呈假阴性，可通过加入0.5mg/ml的氯化钙溶液，或22mg/ml的氯化镁溶液来排除干扰。[29] 2.4 有机盐
核酸钠（Sodium Nucleinate，NN）像细菌内毒素的LPS一样能够被LAL试验所检测，有学者[30]还比较了含有NN热原标准品的兔法与LAL法的测定结果。2.5 透析液
Berland Y[31]总结了在文献报导中有关透析液细菌性污染的资料。透析液中的G-小分子热源物质能够透过正常的透析膜。纤维性透析膜(Cellulosic hemodialysis membranes)比合成膜(synthetic membranes)更容易通过内毒素。聚砜膜及聚酰胺膜(Polysulfone membranes and polyamide membranes)在透析液的那一面能够吸收内毒素。所以，鲎试验不能够检出污染透析液的所有细菌性物质。
Laude-Sharp M[32]等人的实验证明:在体内具有生物活性的多种LPS能够通过透析膜，尽管在血液中没有测到LAL反应物质，所以LAL法作为测定生物液(biological fluids)中是否存在LPS的标准不够充分。日本学者 Yoshioka T [33]等人通过使用无G因子的凝集系统证明了从铜氨人造纤维膜(cuproammonium rayon membranes)得到的LAL反应物质不是内毒素，而是通过另一种途径使LAL凝集，此物质在循环中滞留相当长的时间。并发现在急性及慢性血液透析中，此反应物质平均水平为100-400pg/ml。仲卫华[34]等的实验证明，血液透析液有一定的干扰作用，但可通过稀释法消除。以上研究结果说明用鲎试剂来测定透析液中的内毒素的方法还有待于进一步的考察。
2.6 中药成分[21] 许多种中草药成分能够干扰LAL试验[35]，特别是清热解毒类药物[29]。2.7 生化药品[21] 姜素云[2][36]等证明，氨基酸对鲎试剂有较强的抑制作用。
孔祥文[28]通过实验证明，基因工程蛋白类药物生产中常用的 2-巯基乙醇、2-巯疏糖醇和还原性谷胱甘肽对鲎试验呈色反应有干扰作用，当稀释到5.0μmol/l时,抑制作用近乎消除。2.8 其它物质
另据报道[2][9][21][29]：人血中的多种凝血因子、可使蛋白质变性物质（乙醇、苯酚）或灭活的物质（如氧化剂、抗氧化剂、蛋白水解剂、专一失活剂等）、高糖溶液、络合物、电解质、维生素、添加剂、右旋糖酐-40、抗凝血剂如柠檬酸及肝磷脂等等，都可干扰鲎试剂形成凝胶。3鲎试剂与标准品 3．1 鲎试剂内源性因子
Roth RI与Tobias PS[37]在 研究含有能被细菌内毒素激发引起凝集反应的内毒素敏感因子的鲎试剂色析组份（chromatographic fraction of Limulus lysate）时,用了一种光复活性的、易解离的、放射性同位素标记（photoreactive, cleavable, radiolabeled）的沙门氏菌LPS衍生物（derivative of Salmonella minnesota LPS），LPS-（P-叠氮水杨酰胺）-1，3-二硫丙胺（LPS-(p-Azidosalicylamido)-1,3'-Dithiopropionamide，LPS-ASD），来确定LPS-结合蛋白。结果证明LAL组分中较大的82-kDa蛋白是LPS结合蛋白，充当凝集反应的负调节因子，LAL组分中较小的50-kDa蛋白是对LPS敏感的凝集蛋白的选择物。
日本科学家[38][39][40]发现在日本马蹄蟹（horseshoe crab(Tachypleus tridentatus)）血细胞中存在鲎胞间凝集抑制物（Limulus Intracellular Coagulation Inhibitor，LICI）1型、2型、及3型。LICI-1专一性抑制对鲎LPS-敏感的丝氨酸蛋白酶（limulus lipopolysaccharide-sensitive serine protease），C因子（K1=2.5×106 M-1，S-1）；而LICI-2显著抑制鲎凝集酶（limulus clotting enzyme）（K1=4.3×105 M-1，S-1）；LICI-3强烈抑制对（1，3）-β-D葡聚糖敏感的丝氨酸蛋白酶（(1,3)-beta-D-glucan-sensitive serine protease），G因子（K1=3.9×105 M-1，S-1）。因此，鲎血淋巴凝结过程至少由三个内源性因子所调节：LICI-1 是Mr=48，000，有394个氨基酸的单链糖蛋白，其单一反应位点为-Arg-Ser-;LICI-2 是Mr=42，000，有386个氨基酸的单链糖蛋白，其单一反应位点为-Lys-Ser-;LICI-3 是Mr=53，000，有392个氨基酸的单链糖蛋白，其单一反应位点与LICI-1相同。3．2 试剂质量
不同批号的鲎试剂标示值相同，但试验结果不尽相同，尤其是近效者的灵敏度有明显下降的趋势。所以在更换批号或者用近效期鲎试剂的时候，应对灵敏度进行复核。以确定本批鲎试剂的实际灵敏度。[3] 有的同志发现[11]：使用不同厂家生产的溶解水来溶解鲎试剂，结果会导致假阳性的出现，而使用同厂生产的鲎试剂及溶解水均符合规定。
另外，还有试验者发现[41][42][43]：不同厂家与批号的细菌内毒素工作标准品的灵敏度有很大的差别,有的竟低于50% 以下。支与支之间差异竟达50%。[10] 高丽云[44]在实验中发现如放置半年后重新标定, LAL灵敏度会下降,细菌内毒素工作标准品的效价低于标示量。这可能与细菌内毒素的处方、pH值、冷冻干燥过程以及冻干标准品中加入的如人清蛋白、乳糖、聚乙二醇等添加剂影响细菌内毒素的稳定性有关[2]。参考文献： Levin，J，and Bang, F.B.Bull Johns Hopkins Hosps.265-274(1964)2 陈菡芬 申蕴如 内毒素检查方法研究进展 国外医学药学分册 1992.19(5)3 陈雪梅 用鲎法检查内毒素阳性对照反应不成立时的浅见 中国药检药理工作通讯 1990；2（2）4 郭录平浅谈影响鲎试验的因素 中国药学杂志 1996.31(3)5 苑庆华 孙淑莲 叶志 细菌内毒素标准品溶解时不同混合时间对其活性的影响研究 第三届中日药品分析技术研讨会论文摘要集 1996.10 6 刘敏等 显色基质法测定输液中内毒素含量 中国药事 1996.10(6)7 李菊芬 鲎试剂对热源的检测及有关研究的进展 中国药检药理工作通讯 1991，3（2）8 高国政 颜锦 pH 值影响细菌内毒素测定的实验研究中国药学杂志 1998，33（3）James F.Cooper Resolving LAL Testing Interferences J Parent sci Tech 1991 44(1)13-15 10 侯庆源 鲎试验系统工程化 中国医院药学杂志 1997.17(1)11 姜锦发 用鲎法检查细菌内毒素时影响实验结果因素的探讨 中国药检药理工作通讯 1995，7（1）12 Pedersen MR;Hansen EW Inactivation of B.subtilis spores and E.coli endotoxin by ethylene oxide.J Clin Pharm Ther 1989 Oct;14(5):373-80 13 Bamba T;Matsui R;Watabe K Effect of steam-heat treatment with/without divalent cations on the 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serpin superfamily.Purification, characterization, and cDNA cloning.J Biol Chem 1994 Jan 7 269:1 542-7 41钱维清 关于细菌内毒素工作标准品的质量问题 中国药检药理工作通讯 1991.3(1)42 许文福 不同厂生产细菌内毒素对不同厂生产鲎试剂灵敏度测验研究 中国药检药理工作通讯 1992.4(1)43 邱祖美 细菌内毒素检查法应用情况分析 中国医院药学杂志 1993.13(10)44 高丽云 应用鲎法检查大输液热源体会 中国药学杂志 1995.30(1)
第三篇：科技创新小论文：“活化石”鲎的奇特之处
科技创新小论文：“活化石”鲎的奇特之处
高二（11）班 张梓萌
【摘要】“鲎是什么？”，“鲎的奇特表现在哪些方面？”，“这些特性又对人类社会的发展起到了什么重要的作用？”，“为什么鲎享有 ‘活化石’的美誉？”，“与它同时代的动物或者进化、或者灭绝，为什么惟独只有鲎从4 亿多年前问世至今仍保留其原始而古老的相貌？”。本文通过对鲎的奇特之处及成因分析，解释了鲎的“生物活化石”这一称号的来源。
【关键词】古生物 鲎 特性 活化石
一、引言
当我第一次在电视上知道这种外形奇特的蓝血动物，就对它产生了浓厚的兴趣。想仔细，深入的探究鲎这种生物小小的甲壳下到底掩藏着些什么秘密，让它与普通的海洋生物有这么多不同之处。经过查阅生物资料，询问老师知道对它有了更深的了解：鲎是一类与三叶虫一样古老的动物。鲎的祖先出现在地质历史时期古生代的泥盆纪,当时恐龙尚未崛起，原始鱼类刚刚问世。而之所以命其为“活化石”，是因为随着时间的推移，与它同时代的动物或者进化、或者灭绝，而惟独只有鲎从4 亿多年前问世至今仍保留其原始而古老的相貌。也因为此，让鲎具有了许多现代进化生物所不具备的特性。
二、鲎的奇特之处及成因分析
1、形态奇
鲎形似蟹，其身体分为以关节相连的3部分：宽阔马蹄形的头胸部，小得多的分节的腹部和一根长而尖的尾剑(尾节)。它的消化系统也与众不同。食物是进入磨胃(砂囊)后被磨碎。体内有一个大型的器官，称为肝胰腺，可将消化酶分泌入长形的胃肠内。而在这众多奇特的形态中，我觉得鲎的眼睛是最值得研究的。
鲎有四只眼睛。头胸甲前端有0.5毫米的两只小眼睛，小眼睛对紫外光最敏感，说明这对眼睛只用来感知亮度。在鲎的头胸甲两侧有一对大复眼，每只眼睛是由若干个小眼睛组成。人们发现鲎的复眼有一种侧抑制现象，也就是能使物体的图像更加清晰，这一原理被应用于电视和雷达系统中，提高了电视成像的清晰度和雷达的显示灵敏度。为此，这种亿万年默默无闻的古老动物一跃而成为近代仿生学中一颗引人瞩目的“明星”。
据研究表明，现在生存的鲎与奥陶纪时期化石显示的鲎形态极为相似，正因为鲎在约4年的时间中没有过多的进化，才使得如今的鲎有着奇异的形态。
2、习性奇
鲎为暖水性的底栖节肢动物，栖息于20－60米水深的砂质底浅海区，喜潜砂穴居，只露出剑尾。食性广，以动物为主，经常以底栖和埋木本的小型甲壳动物、小型软体动物、环节动物、星虫、海豆芽等为食，有时也吃一些有机碎屑。中国鲎在中国福建沿海从4月下旬至8月底均可繁殖。自立夏至处暑进入产卵盛期。大潮时多数雄鲎抱住雌鲎成对爬到砂滩上挖穴产卵。福州平潭每到农历六月,就有大量的鲎爬上岸,当地有民谚称:六月鲎,爬上灶.3、繁殖奇
春、夏两季，通常于日落後，在大潮的沙滩上产卵。每个雌鲎由一个或多个雄鲎伴随，在沙上挖一系列浅坑，每个坑中产卵200∼300粒，然後雄鲎用精液将卵覆盖。一般产卵地点正好在高潮线下。数周後幼体从卵中孵出，约长5公釐(0.2吋)，以贮存的卵黄为营养来源。第二幼体期的个体已有一条短小的尾节，以小型动物为食，在泥滩中越冬。第三幼体期的个体形似微小的成体。幼体经蜕皮进入下一个幼体期，此时表皮围绕头胸部边缘裂开，然後脱落。每次蜕皮体长即增加约25％。到9∼12岁时约蜕皮16次达到性成熟。成体以海生蠕虫为食，身上常覆以各种带壳的生物。
每当春夏季鲎的繁殖季节，雌雄一旦结为夫妻，便形影不离，肥大的雌鲎常驮着瘦小的丈夫蹒跚而行。此时捉到一只鲎，提起来便是一对，故鲎享“海底鸳鸯”之美称。
4、血液奇
鲎的血液中含有铜离子，它的血液是蓝色的。这种蓝色血液的提取物——“鲎试剂”，可以准确、快速地检测人体内部组织是否因细菌感染而致病；在制药和食品工业中，可用它对毒素污染进行监测。科学家也使用鲎血研究癌症.但是,对鲎抽血后,它们就被放生.鲎血液颜色呈蓝色，是因为鲎血浆的主要成分是血蓝蛋白，每1ml血蓝蛋白含重金属有机铜(Cu2+)在0.28~0.31mg（鲎脱离水面时间长短差异）。按每只(雄、雌性)鲎平均体重比值计算，成年鲎的血浆及肉质中含这种铜自质(Cu2+)分别在 600~1300mg。
三、结束语
经过上述的研究，对鲎有了一定的了解：我们知道了“生物活化石”这一称号的来源，也感受了鲎的各个方面的奇特。我们现在已经知道鲎是海中的活化石，它的出现比恐龙还要早。如今恐龙早已灭绝了，而鲎经历了一场场灾难，奇迹般地存活至今，而且形态也没有发生变化，这是什么原因呢？美国科学家认为：这些活化石从2.5亿年前就已停止了进化，能够存活至今是得益于非常规的健康状况。鲎的体内有非常独特的免疫系统，可以防止受到海水中病原体的感染。当病毒或微生物侵入鲎体内后，鲎的蓝色血液会作出不同的反应。如一接触到霍乱弧菌，鲎的血液就会立即凝固，令细菌失去繁殖作用。随后，血液就会形成一道屏障，阻止其他细菌入侵。我认为除此之外还有两个原因：一是因为鲎的繁殖速度快，繁殖能力较强；二是鲎肉的口感较差，而且食用后容易发生机体过敏和中毒性休克等，由于鲎具有的特殊生理毒理性质,一直以来极少被人们捕杀。就如达尔文所言没有竞争与死亡，不能进行优胜劣汰这一机制，生物进化的可能性就会相对减少很多。我认为综合以上三点，就是鲎能保持原有形态且没有灭亡的主要原因。
第四篇：研究专题
2010-2011学年劳技教育研究专题
一、创建特色劳技基地
小学的劳技教学内容要与小学生的生活紧紧结合起来，要有一些具有时代意义的内容。我们应关爱着每一个学生全面素质的提高，让他们从小就培养起有坚强的毅力、一定的自理能力、团结协作的精神与创新精神，达到提高全民族创新精神、实践能力和整体素质的目的。
1、增添符合本土地区特色的教学内容
由于小学生的劳动内容较多，涉及范围也比较广，因而劳技课教学内容也应该是丰富多彩的，涉及的面要广，如我们能增添一些符合本土地区特色的教学内容，那么学生的学习情趣无疑是能够被激发的。例如：在教传统工艺、缝纫、烹调、种植、金工木工、生活常识等时，我们可以适当的掺插本土地区资源，教学生养殖方面的经验，来帮助学生在劳技课中学到多方面的知识与技能。在“传统工艺”课上，除教学生编制一些简单易学的传统工艺品之外，我们可以增添欣赏当地的早期绣花作品等内容，让学生了解我们的民间工艺，培养学生心灵手巧、做事仔细认真的态度；在“种植”中，可以增添“教学生种植花草，养花插花，培养学生的生活情趣等等。
2、开设学校特色化教育的课程
学校特色化课程首先应该是学校区别与其他学校的一种独有的、个性化的课程。在开发的进程中，有必要立足于学校的特定资源。依托本土资源，创建特色劳技基地是我们学校一个独特的课程资源。在其课程资源里，我校要求教师必须给学生以有选择学习的权利，在教学中，要有不同层次的要求，面向全体，全面发展，因材施教。如在教学“炒菜”这课时，我们是先让同学们到家里去询问爸妈如何制作菜肴，了解制作的过程，简单作好笔记。再到课堂上来通过互相讨论，然后到家里由爸妈在场辅导的情况下进行操作。在制作要求上，不要求学生做同一种菜，而是让学生自己选菜、配菜，做不同的炒菜，这样，课堂上人人参与，不同层次的学生都能获得成功的喜悦和自信。
二、打造特色劳技课堂
美国心理学家罗杰斯认为：“成功的教育依赖于一种真诚的理解和信任的师生关系，依赖于一种和谐、安全的课堂气氛。”
（一）创建适合学生的教学形式
适合学生的教学形式必须在建立平等、民主、和谐的师生关系下进行。著名教育家魏书生说，他的成功
一、科学，二、民主。可见，平等、民主、和谐的师生关系在教学中具有何等重要的作用。教师把信任的目光投向每一位学生，把尊重的话语送给每一位学生，把和蔼的微笑洒向每一位学生，用平等的身份对待每一位学生，这样的教师必然会赢得学生的信任和喜爱。这种良好的师生关系能使学生产生最佳的学习心态，轻松愉快地学习。
学生劳动知识的获得，劳动技能的形成，绝不是仅课堂上教师的教学技能所能解决的，它更需要学生自身的劳动实践。实践出真知，没有劳动实践的劳动技术教育只是纸上谈兵，不能算真正的劳动技术教育。所以没有在适合学生教学形式下学习的教育是不出有能力的学生的。
（二）创设符合学生的教学环境
在过去的课堂教学中总是以教师为中心。而我们的劳技课堂虽然在一定程度上比其他学科的课堂气氛要好，但也逃脱不了教学就是教师将自己所拥有的知识传授给学生，课堂教学关系就是：教师讲，学生听；教师问，学生答；教师教多少，学生学多少；教师怎么教，学生怎么学的教学环境。这使得学生机械地按照教师所讲的、所示范的方法与步骤进行操作，在很大程度上限制了学生的思维个性化和行为个性化的发展。
我们应该把课堂教学的过程看成是师生交往、积极互动、共同发展的过程，充分体现学生的主体地位。例如：我们不妨改变传统的教学模式，把课桌椅摆放进行合理布局，不拘一格，以小组合作的形式，让学生在自学、互学、合作的活动中学习，尝试错误，获得成功。教师的角色应该转变为学生学习的组织者、引导者和合作者。有时，教师甚至可以是学生的“同学”，和学生打成一片，同学，同玩，同做，同乐，相互配合，相互帮助，教·学·做三合一。教师与学生分享彼此的思考、创造和知识，在交流彼此的情感与观点中，求得新的发现。这一转变，对学生而言，意味着心态的开放、思维的解放、个性思维的呈现、创新意识的滋长；对教师而言，意味着上课不是单纯的知识传授，更重要的是关注学生的劳动思维变化与发展，关注学生在劳动中的个性体现和创新能力的培养。因此，在课堂教学中，教师要真正从内心认识到：教师与学生是完全平等的。教师要努力使学生感到：老师与我们在一起学习，一起探索。不要让学生觉得：老师比学生更聪明；老师是该怎么
做的代表者。特别是在小学低年级，学生的思维依赖性很强，如果他发现了老师教给的方法是最好的，那么他就不再去自己思考了。
1、有效教学，提高学生劳动能力
小学生天生爱玩，如果把劳动技术教育与游戏、比赛、表演等方法相结合，寓教于乐，事半功倍。
竞赛：竞赛是激励学生好胜心，取得优良劳动成果的手段，是利用情感动力功能，调动学生学习积极性的一种有效方法。在比赛过程中，学生的学习兴趣、克服困难的毅力以及成功的喜悦得到增强，因此，劳动效率会有很大提高。比赛的方式有个人比赛、团体比赛、自我比赛和能力分组比赛。如“课前可采用小组收集有关材料，进行尝试性实践，课中针对劳动过程开展个人或团体比赛，课后对劳动成果开展评比，使自己在不断比赛中提高、超越。
表演：前苏联著名心理学家维国茨基曾讲到表演教学的好处：一是由孩子自己进行，有直接生活感受，二是能促使孩子的思维发展，激发他们的创新意识。表演完全符合小学生爱动好玩、富于想象、善于模仿的年龄特征，因而特别受孩子们的喜爱。事先让学生按兴趣爱好自由组合成表演小组，然后根据特长选定内容。由于内容形式不受限制，又有充分的准备时间；表演时学生总能拿出各自的拿手好戏。这样，准备、表演多次练习，学生的技能自然会得到提高，而且培养了他们的协作精神。
效仿：计算机网络的应用为劳动技术教育开创了更为宽广的新天地。例如，要让学生学会上超市购物，可设计相应的模拟情境，让学生在网上逛超市、购物、付款，集趣味性、实践性、综合性于一体。
2、互助合作，提高课堂教学效率
学生在制作面具时，有几个不会画小动物，有几个动物五官的位置没粘贴好。我在肯定了他们的成绩后，鼓励他们吸取经验教训；然后组织互帮互学，让他们自由组合，在制作时，学会关心、合作，交流。这样，学生与初制作时态度有了很大的转变。他们手拿着自己与人合作的心爱面具，体会到了合作的愉悦，成功的快乐。脸上绽开了灿烂的笑脸。
三、开辟特色劳技资源
劳技教育特色的创建，可谓十年磨一剑，在我们学校师生共同努力下，目前我们学校劳动实践基地正在茁壮成长。学生可以在那里进行观察、种植、养殖等多方面的实践活动，可以听王建立老师的讲解，可以亲自到田地里去劳动。
（一）立足课堂，促成有效教学
1、重视想象，拓展联想
丰富的想象是创造的源泉。在教学中，挖掘教材创造想象的内容，鼓励学生主动探求知识，启发联想，举一反三，触类旁通。如学习《缝制捕捉昆虫网》一文前，我叫大家看看书，做一些课前准备：想想，除了书上提到的材料外，还能用什么材料来做？缝制昆虫网的方法只有一种吗？课堂上我大开眼界。他们由纱布得到启发，展开想象，联想到窗纱、袜子、网兜等。制作开始了，有的用针缝，有的用铅丝绑，还有的用发卡穿。大家做出来的网兜也各不相同，有三角形、椭圆形、葫芦形等。大家还陈述了自己昆虫网的优点：用袜子做昆虫网，能粘住虫子；椭圆形的网出口小；葫芦形的网，虫子更难逃脱。在老师的启发下，学生展开想象，有了自主权，自主探索的意识提高了，拓展联想的空间更广阔。随着时间的推延，学生的观察能力、思考能力、动手能力、想象能力和适应社会的能力都会不断提高，为明天走向社会奠定了坚实的基础。
2、亲身经历，学会发现
在学习《给小树穿冬衣》一文时，我带着草绳、剪刀，领着学生来到操场的一角，一边讲解一边做示范动作，然后学生分组行动。等完工后，请大家谈谈体会，说说有没有发现问题。一个说，太费时、费力；另一个说，太费材料了。我接着说，既然有那么多的问题，想解决吗？大家七嘴八舌地议论开了：有的说，织不同尺寸的“草衣”给小树穿，穿的方法像绑沙袋，这样，穿脱自如；有的说，用编织袋的布来做“树衣”，做上拉练，因为编织袋的布结实，能重复使用，这样既方便又省料„„真不敢低估这些学生们的创新意识和创造能力。实践证明，通过学生的自主探究，同样可以达到教师讲解示范所达到的学生那种操作技能的形成。而且学生在探究的过程中，还学会了合作，学会了交流；在动手、动脑思维与操作紧密结合中又促进了技术素养的形成，同时还培养了学生创新意识，使他们产生了创造的欲望。
（二）深入实践，适应现代社会的发展
1、通过多种途径为学生提供具体的现实的情境，让学生走出课堂，置身于广阔的大自然和丰富的社会生活中，通过亲身经历、实际操作与活动来获得丰实的体验。关注学生的主体意识，把每一个学生都当作具有自己的独特经验和情感态度的人，与学生建立起一种真诚、平等、信任的相互关系，为学生主动发展提供一种宽松、融洽的心理氛围。
2、通过多种方式如组织参观、访问、考察、实验等，为学生创设一定的问题情境，激活学生原有的知识储备，诱发探究动机。促使学生学会利用多种有效手段、通过多种渠道在开放的情境中自觉收集和加工处理信息。教师协助学生设计解决问题的方案、掌握科学探究的基本方法，注重启发思路、提供线索，而不是把学生的探究引向一个已有的结论。
3、疏通交往渠道，为学生提供多种交往的条件和机会。协调人际关系，营造民主平等、和谐融洽、团结互助的心理环境。综合采用多种交流形式，并根据实际需要随时进行调整。当学生以合作小组的形式展开活动时，引导学生制定小组共同目标，分享学习资料和劳动设备，协助学生安排不同的角色分担相应的责任，组织小组成果汇报与交流，让学生共享成功的喜悦。
4、重视学生在学习过程中的自我评价和自我改进，使评价成为学生反思自我、发现自我、发展自我的过程；允许学生对问题的解决持不同的方案，对学习结果的表现形式也可丰富多样；关注学生在某一些方面的特别收获，同时顾及学生的个别差异，推动每一个学生在原有水平上有新的进展。
第五篇：研究总结
感恩教育研究工作报告
一、对中学生感恩教育的研究工作的认识
中华民族是一个古老的民族，也是一个崇尚仁义、知恩图报的民族。知感恩，懂回报是中华民族的传统美德。当前，感恩意识的缺失非常普遍，在商品经济大潮的冲击和多元文化的碰撞之下，人们在物质享受得到极大的满足的同时，精神的因子却逐渐从灵魂和肉体中消失。人们享受着大自然赐予的阳光雨露，却肆意破坏朝夕相处的环境；面对父母的哺育之恩，孝心和赡养观念却异常淡漠，只知受惠，不知感恩；享受别人带给自己的快乐，只知索取，不知奉献；在人际交往中以“自我”为中心，只懂被爱，不知回报；在祖国的滋养中成长，对国家、社会给予的关爱认为理所当然，只会接受，不知责任…… 感恩意识在逐渐淡化。孩子们不知感谢自然的滋养之恩，不知感谢父母的养育之恩，不知感谢老师的教导之恩，不知感谢祖国、社会对自己培育之恩。
感恩教育是一种以人格完善为目的的人性教育，是一种以情动情的情感教育，有了感恩之心，人与人、人与自然、人与社会也会变得更加和谐、更加亲切，学生自身也会因为这种感恩心理的形成而感到愉快，更加健康，这也是学生责任意识、自立意识、自尊意识等健全的主体人格的构建。学会感恩，能够呼唤人间真情，抒发美好情感，树立崇高追求，陶冶高尚情操，进而营造和谐社会。
《中共中央关于进一步加强未成年人思想道德建设若干意见》指出对青少年思想道德教育要“坚持贴近实际、贴近生活、贴近未成年人的原则”，要“从他们的具体实际和生活实际出发，深入浅出”，“要注重实践教育、体验教育、养成教育”。
二、研究工作的组织和保障措施
（一)组织
顾问：刘志敏 张晓梅（市科研所所长、专家）课题领导小组：
组
长：马彦忠（校长、提供课题的经费、保障课题的结题）副组长：代凤仁（教导处主任、负责筹措课题经费和课题管理）
成员：郭玉巍（教导处副主任、负责统筹课题的运作、协助完成课题的各项工作）
李冬辉（课题组负责人，负责实验教师和课题的管理，课题的研究、制度的落实、完成工作报告的撰写）课题实验小组：
负责人：李冬辉（课题总负责人、负责实验教师和课题的管理，课题的研究、制度的落实、完成工作报告的撰写）
成员：（课题参与实验研究与实践，心理素质养成教育研究）实验教师分工：
王兴：负责实验通讯和关注总课题组及科研所的网站及邮箱。撰写研究方案、各阶段总结 王宏锋：负责实验活动及会议记录，撰写研究方案、各阶段总结
郑树禹：负责课题活动的组织、学生作品的编辑、撰写研究方案、各阶段总结
李艳军：负责信息技术及多媒体培训，课题文件的编辑，打印 马学军：负责课题研究过程中的录像、摄像、材料汇编 郭玉巍：负责课题研究整理、收集资料、存档等工作 王海澎：负责调查问卷的整理与分析，撰写调查报告
胡忠平、曹淑芬、赵丽华、王丽丽、郭永恩、张淑巍、王玉洁、牛聪颖、黄绍杰、孙玉龙、路俊杰、于英杰、王丽杰参与实验研究的心理辅导、个案设计 负责课题的宣传、资料的收集与整理
三、保障措施
多次召开本课题的研究会议，还专门拨出经费用于此课题的研究。为把本课题的研究落到实处，学校多次组织学生开展问卷调查，积累丰富的第一手资料。学校还设有专门的阅览室与图书资料室，这些无疑为本课题研究提供坚实的基础和必备的研究条件。
四、课题研究的成绩
李冬辉：2012教学设计《Unit 3 English Around the World SectionA》获得一等奖；优质课《unit 3 English Around the World SectionA》获得一等奖；2012论文《浅谈英语教学中的感恩教育》获得一等奖；2012优质课说课《Uint3 English Around the World Topic 2 Section B 》获得一等奖； 王兴：2012年优质课说课稿《平行线的性质》获得一等奖；
2012论文《农村贫困生感恩思想状况分析及对策》获得一等奖。王宏锋：2012优质课说课《理智面对学习压力》获得一等奖；；
2012论文《教师在实施素质教育中首先转变观念》获得一等奖。代凤仁：2012优质课五四爱国运动获得一等奖；论文《中学生思想教育的培养》获得一等奖。
2013年优质课 《五四爱国运动》获得一等奖；
马学军：2012年《心育》优质课说课稿《前滚翻、障碍跑》获得一等奖； 郑树禹：2012个案《心理素质养成教育个案》获得一等奖。郭玉巍：2012论文《中学生心理教育的培养》获得一等奖。说课《Unit5 Topic2 SectionB》获得一等奖获得一等奖；； 2013年说课《Unit 5 Topic2 Section B》获得一等奖；
2014年说课《Unit12 Don’t eat in class.》获得一等奖；优质课 《 A Telephone Call 》获得一等奖；
李艳军：2012《心育》教学设计
《感动就在一瞬间》获得一等奖；
胡忠平；2012教学设计《汽化和液化》获得一等奖。优质课《内能》获得一等奖；2013优质课《第十三章 第2节 内能》获得一等奖； 王丽丽 ：2012论文
《爱的奉献》获得一等奖；
牛聪颖：2012教学设计《Unit 8 When is your birthday? 》获得一等奖；
Section A》获得一等奖；
2013《心育》论文《如何活跃英语课堂气氛》获得一等奖；
2013年优质课 《Unit 6 I’m more outgoing than my sister.Section A》获得一等奖；
2014年论文《如何提高初中学生学习地理的兴趣》获得一等奖；
黄绍杰：2012论文《家贫生感恩教育》获得一等奖；
赵丽华：2012教学设计《Unit6
Entertainment and Friendship Topic 2 Section B》获得一等奖；
“感恩”一词在《现代汉语词典》里解释为“对别人所给的帮助表示感激”。感恩是人类精神生活中的重要课题，是一个人正常的、被世俗社会所认可的一种思想情感状态。有学者提出所谓感恩，就是“对自然、社会和他人给自己的恩惠和方便由衷认可，并真诚回报的一种认识、情感和行为。”感恩犹如心灵的泉水，它源源不断地滋润着心田，让生命充满生机，遍洒阳光，享受社会的美好和幸福。
感恩教育就是通过有效的方法与手段引导学生培养感恩意识，开展感恩教育活动，使学生知恩图报，不忘国之恩，党之恩，社会之恩，老师之恩，养育之恩，帮助之恩……使“滴水之恩当涌泉相报”之情生根、开花、结果。
三、研究内容
我们这个课题研究的重点在于对小学生开展感恩教育，从生活入手，让学生意识到父母、老师、同学和身边的人对自己的关爱和帮助，教育他们知恩图报，从而爱父母，爱老师，爱同学，然后通过一些具体活动，让学生推恩及恩，进而爱自然，爱生命，爱祖国，逐步使感恩成为一种态度，一种美德。
1、感恩意识的培养途径研究
具体内容有：①对自然的敬畏之心；②对父母亲人的报答之心：；③对师长的敬重之心；④对社会的仁爱之心；⑤对祖国、人民的热爱之心。
2、感恩活动的开展研究
具体内容有：①感恩教育调查；②感恩意识的培养（案例、报告）；③学校感恩活动开展（案例、报告）；④感恩行为品质的养成教育⑤感恩教育论文。
3、感恩行为的规范研究
具体内容：①对待父母及亲人的态度与行为；②对待师长的态度与行为；③对待学习态度与行为；④对待社会的态度与行为；⑤对待自然的态度与行为。
四、研究目标
本课题的预期目标是：培养学生的感恩意识，懂得心存感激和知恩图报。树立学生的感恩情怀，懂得爱父母，爱老师，爱同学，爱祖国，爱自然，爱生命，对给予自己关爱和帮助的人怀有感恩之心。通过一系列感恩教育活动。使学生的感恩情怀化为美好的品德。
五、研究方法
感恩教育，以小见大，由此及彼。横向辐射，纵向延伸，造福家庭，服务社会。以主题活动、学科渗透、课外延伸为载体，以角色换位、实践体会为行动策略
根据课题性质，类型，主要采用：
1、行动研究法，在一系列具体活动中，对学生进行跟踪调查，对发现的问题及时调整和改正，最终形成一套比较完善的感恩教育的体系和机制。
2、辅助采取调查法。
3、文献研究法和观察法等。
六、研究步骤：
第一阶段：准备阶段（2009年10月—2009年11月）
1、建立课题研究组，明确分工。
2、制定研究方案。
3、学习相关理论资料。
第二阶段：研究阶段（2009年12月—2010年6月）
1、各种感恩活动方案的制定与开展。
2、阶段总结。
3、关于各种感恩活动的理论研究。
4、形成一些有价值的阶段性的成果加以完善。第三阶段：结题阶段（2010年7月—2010年9月）
1、课题组成员完成研究成果，进行资料整理。
2、完成课题论文、研究报告，申请结题。
七、研究过程及成果
（一）、开展问卷调查，了解感恩现状
为了解小学生感恩意识的现状，我们进行了问卷调查。在我校小学3-6年级160名学生进行问卷调查，共发出调查问卷160份，收回调查问卷160份，其中男生86人(占53.75 %)、女生74人(占46.25%)。整套问卷共设计20道选择题，分别涉及学生的感恩认知、感恩情感和感恩行为。小学生感恩认知是本次调查的基点，它主要包括学生对感恩、知恩、识恩、报恩的必要性的认识。大多数学生表示感恩父母、老师、社会、自然是应该的。感恩情感是人们在认识感恩时所产生喜与悲、乐与苦、爱与恨等主观体验。我们结合小学生实际设置部分情境的愉悦度调查，其他采取访谈形式。88.75%的学生愉悦于被他人帮助，94.375%的学生高兴于以优异的学习成绩回报了老师的教育、父母的养育，95%的学生对帮助他人感到愉悦，96.25%的学生对回报了曾帮助过自已的人感到高兴。
对小学生感恩行为的调查，根据感恩的对象分为感恩父母的行为、感恩师长与他人的行为、感恩社会的行为及感恩自然的行为。由调查可知，只有13.75%的学生经常表达对父母的祝福、感谢，15%的学生偶尔表达，71.25%的学生没有表达过对父母的祝福、感谢；只有16.25%的学生在父母工作劳累或不舒服时会主动做家务，17.5%的学生偶尔做，而没有做过的居然占到66.25。这种令人遗憾的现象说明小学生感恩父母的意识并没有转化为行动。.由调查可知，26.25%的学生在公交车上经常主动给他人让座，13.125%的学生不会让座；对于参加公益活动，86.875%的学生愿意参加，这说明小学生参与意识强，绝人多数愿意参加公益活动。目前针对小学生开展的公益活动少之又少，多组织适合小学生参加的公益活动也有利于他们感恩意识和行为的培养。
由调查可知，只有11.875%的学生经常随手乱扔垃圾，11.25%的学生经常践踏学校草坪。这说明目前针对小学生在保护环境、感恩自然方面的教育取得了一定成效。
（二）、对学生进行感恩必要性教育，让学生知恩，懂恩。
1、、营造良好的感恩教育氛围，让学生知恩。
我们针对大多数学生感恩教育缺失的现象，首先在全体学生中进行感恩知识专题讲座。通过这次讲座让学生明白什么是感恩，感恩就是回报，就是感激，让学生明白我们需要感恩，把生活中的一些感恩故事与学生产生共鸣，在学生情感上激起浪花，最后明白感恩就在身边，离自己很近，触手可及，动手可做，有时只是一个表情，有时只是一个简单的动作，只要心存感激，那么就会成为一个会感恩的人。
2、了解身边的感恩故事，让学生懂恩。
学生在对感恩有了初步的认识后，这还不够，我们让学生进一步去观察去发现身边的感恩故事，比如了解你的同学，你的老师，你的父母，你的周围环境，你的祖国，认真去感受，更进一步地加深学生对感恩的了解。以此为契机，我们准备了一些活动。
在“今天我当家”的实践活动，让学生在节假日里当一天家，让学生体会父母的辛苦，感受父母的付出，从而获得了真实的感受，理解到当家的不易，明白了孝敬父母的道理，学会为父母分忧，学会了感谢，学会了关心，增进了父母与孩子之间的感情。
在“同伴对我的帮助”的主题班会活动中，让学生敞开心扉，在班会上通过对平时生活中点滴小事的回忆，重温温馨的友谊，让每一位同学都认识到同学朋友的真切关怀，懂得对别人的帮助要怀有一颗感恩的心。让学生懂得关心、爱护、帮助别人，使学生懂得珍惜友谊，学会宽容谦和的态度与人相处，学会感激人，关心他人。
我们还开展观看爱国影片活动来对学生进行爱国注意教育和革命传统教育，激励小时真系幸福生活，树立感恩意识。在观看了《闪闪的红星》、《小兵张嘎》、《火烧圆明园》之后，学生们认识到了落后就要挨打，今天的幸福生活来之不易，是无数的革命先烈和革命志士抛头颅、洒热血换来的，我们只有现在好好学习，长大了报效祖国，中华民族才能永远屹立于世界民族之林。
对于个人而言，我们不但接受老师、父母、社会的恩泽，还在享受着大自然带给我们的各种赐予。但是我们中的很多人却毫无感恩意识，认为理所应当，在无节制的挥霍的同时，还在肆意破坏着大自然，对学生进行环保教育迫在眉睫，正是在这一认识的基础上，我们组织了“祖国在心中，环保在行动”-----观看环保影片、召开绿色主题班会、征集环保标语系列活动。让学生了解破坏环境的危害，从内心深处打动学生，使同学们意识到环境保护的重要性和紧迫性，懂得了环保的知识，了解环保的一些措施，并顺势引导号召全体学生：从身边做起，从小事做起，动动手，让校园环境更温馨；弯弯腰，让校园环境更洁净。在征集环保标语中，同学们积极响应，搜集设计了许多标语，这些标语有的辞藻优美，琅琅上口：“留住草的美，体现你的美”，“一花一草皆生命，一枝一叶总关情”；有的振聋发聩，引人深省：“别让我们的眼泪成为世界上的最后一滴水”，有的语言朴实，充满童趣：“还地球妈妈一张干净的脸吧”，“天空是小鸟的家，河流是鱼儿的家，地球是我们的家”。生动有趣的标语不但易记，而且对学生起到了很好的教育效果。
（三）开展感恩行为活动，让学生报恩、施恩。
在对学生进行比较系统的知恩、懂恩教育后，我们适时组织学生利用学校和社会这个大熔炉，开展一系列丰富多彩的活动，培养学生会感恩会报恩的品质。
1、利用节假日开展感恩教育活动
在清明节，人们都有纪念祖先或缅怀先烈的习俗。为纪念这个有着深远意义的日子，缅怀革命先烈，弘扬爱国主义精神，加强爱国主义教育，引导广大青少年树立正确的世界观、人生观、价值观。我们利用清明节，组织我校师生代表到叶县革命烈士陵园进行了扫墓活动。
活动自始至终，各位参加队员都严肃对待。首先由少先队员代表献了花圈，将代表着纯真、热忱的花圈放在烈士纪念碑前。然后全体少先队员默哀三分钟，向这些为了我们今天幸福生活而英勇捐躯的英雄和先烈致敬、默哀，感受着记载在历史的长河中英雄的事迹。之后请叶县革命烈士陵园余主任给师生们讲革命烈士们的历史故事，让我们真正了解了各位烈士的英雄事迹，理解中国共产党的艰辛和伟大，我们懂得了和平的来之不易，接着再由少先队员代表讲话，她代表学生表明了决心。随后由大队辅导员带讲话，要求队员们要向向烈士致敬，烈士学习，好好学习，为建设美好家园而努力学习。
回校后，各班召开了班队会，参加扫墓的师生代表介绍了本次扫墓的过程，使全体同学都接受了一次深刻的爱国主义教育活动。随后，经过同学们的精心准备，我校召开了“感恩英雄先烈，弘扬民族精神”的演讲活动，通过这次演讲比赛，使全体师生们受到了强烈的爱国主义教育，增强了历史责任感和使命感，大大地激发了师生们热爱祖国、热爱新生活的情怀，真正让同学们认识到：今天我们悼念革命先烈，缅怀革命先烈的丰功伟绩，就是要以先辈为榜样，为我中华之崛起而读书，使自己成为祖国建设的栋梁之材。正如一位同学在演讲里讲到：“我们应该记住千千万万的烈士们，在国家最需要的时刻，他们抛弃了家庭和个人的一切，毫不犹豫，勇往直前，把宝贵的生命无私的献给了祖国和人民，把满腔的热血洒遍祖国的大地。他们的英明将与日月同辉，与江河共存。唯有记住他们，我们才能更强烈的感到，中华民族的心崛起需要我们每一个后来者奋发图强，沿着英雄们的足迹前进、前进、再前进！
我们利用三八节开展“我为妈妈洗脚”感恩活动，在“三八”节这一天为辛苦的妈妈洗脚，在洗脚的过程中可以学着给妈妈按摩脚部，跟妈妈聊天、讲笑话，让妈妈的身体和精神得到放松，感受自己的行动给妈妈带来的愉悦。此次活动培养了学生感恩父母、孝敬父母的道德意识和行为习惯。许多家长也反应这次活动后，好多学生在家里比以前懂事多了，不再任性了，有的开始抢着做家务了，这样的活动和教育应该多做几次，我们在元旦开展了“感恩老师，我为老师送贺卡”活动，通过这一次自制贺卡的活动，让同学们充分发挥自己的想象力和创造力表达对老师深深的爱。每一张精致漂亮的贺卡都凝聚着同学们对老师深深的祝福，饱含了浓浓的爱意，一句句感人肺腑的话语都饱含着一份沉甸甸的爱与感恩：“小小贺卡，虽不华丽，但这是我的一份心意，送给我最亲爱的老师。“献给敬爱的老师：”象天空一样高远的是您的胸怀，象大山一样深重的是您的恩情！老师！请接爱我诚挚的祝”，“亲爱的老师，您就象那春天的细雨，滋润着我们的心田。您给予我们的爱和关怀将鼓舞着我们走过艰难困苦。”本次活动取得了圆满的成功，达到了使学生学会向老师感恩，感恩老师的爱心，感恩老师的劳动，感恩老师的教诲的目的。同时通过这次活动加强师生交流，增进师生感情，改善师生关系，让学生懂得学会感恩，表达对老师的感激之情，从而激励学生更加热爱老师、尊敬老师！
在植树节开展植树活动，给我们的家园增添一点绿色，为给学校发展作点贡献，使我们的生活环境更加美丽。在父亲节里我们开展“放歌六月，感恩父亲”活动等等，向辛苦劳作的父亲说一声谢谢，道一声辛苦了。为长辈送上一个温馨的祝福，让父亲享受一份感动。同学们在活动中感悟到长辈的恩情，也体会到爸爸妈妈也需要我们的关心，一个简单的动作会让他们露出笑脸。做个心中有爱、心中有情、懂事的好孩子。
2、让学生走进社会，走进农家，通过社会实践，感恩社会，回报社会，不断增强感恩思想，不断提高社会公德意识。
我们特别组织学生在三月份开展了知恩、感恩、关爱孤寡老人活动，让学生走进孤寡老人家中，给他们送去温暖，送去爱心，送去欢声笑语，在给孤寡老人的孤寂的晚年送去一份关爱的同时，也给学生们心底种下学会施爱的种子。
（四）知恩、懂恩、报恩、施恩，不能仅限于一次次的活动中，还要作为学生的一种品质修养常抓不懈，持之以恒，把感恩的行为经常化，把学生的感恩行为养成习惯，变成自觉的行为。
我们号召学生不管校内校外一个样，对人对物一个样，心存感恩意识，常怀感恩思想，伸出友爱的双手，撒播爱心的种子。通过我们的努力宣传教育，我们看到了学生之间礼貌待人、互帮互助蔚然成风；学校里脏乱差现象不见了，取而代之的是一个干净整洁环境优美的校园环境；见了老师主动打招呼的比比皆是；向灾区捐款，每个同学都是踊跃参与……正如一个同学在“感恩老师，与爱通行”现场作文竞赛里写到：老师，您的付出无法衡量，您的爱像一盏明灯，引领我们走向灿烂的明天，您的爱像一叶小舟，承载着我们，在书海里尽情遨游……还有一个同学在“感恩父母”手抄报活动中写到：是谁不分昼夜地操劳？是谁在半夜为我掖好被角？是谁在风雨中接送我上学放学？是我的父母！他们把源源不断的爱播撒在我心间，而无怨无悔。谁言寸草心，报得三春晖。我绝不辜负他们的期望。我想用歌声唱给您： 感恩的心 感谢命运
花开花落我一样会珍惜 感恩的心感谢有你
伴我一生让我有勇气作我自己 感恩的心感谢命运
花开花落我一样会珍惜。
（五）、对学生进行感恩实践教育后测调查
我们的课题从09年10月开始，历时一年，通过开展大量实践活动，对学生进行跟踪调查，深入研究分析，在学校的大力支持和各位老师的共同努力下，课题得以圆满完成。在教育活动即将完成时，我们进行了后期调查。调查以问卷形式进行，比较前期调查问卷，以活动期间时间为限，在我校小学3-6年级160名学生进行问卷调查，共发出调查问卷160份，整套问卷共设计20道选择题，分别涉及学生的感恩认知、感恩情感和感恩行为。学生的感恩情感得到了明显的升华，学生对感恩的认识增强后，更能体会到感恩。
在活动期间，78.75%的学生经常表达对父母的祝福、感谢，只有1.25%的学生没有表达过，在父母劳累或不舒服时，56.25%的学生会主动做家务，有5%的学生没有做。
调查还可知，教师节有91.725%的学生给老师送出了礼物，别人遇到困难会主动帮助的学生有95%，老师伤了学生的自尊心，有98.75的学生会原谅。所有的学生都愿意参加公益活动。只有3%的学生会经常随手扔垃圾，1%的学生会践踏草坪。
从测试问卷调查结果可以看出，经过一系列感恩教育活动，学生的感恩意识明显增强，感恩情感得到了升华，感恩行为明显增多，并在生活中初步养成了感恩习惯。
（六）通过几年课题研究，我们在学生感恩教育及培养上取得了可喜的成绩，获得了显著的教育效果，产生了较深的社会影响。
1、学生的感恩意识增强
通过对学生感恩教育与培养的研究，唤醒学生的感恩意识，懂得心存感激和知恩图报。树立学生的感恩情怀，懂得爱父母和爱老师，爱同学，爱自然，爱社会，对给予自己关怀和帮助过自己的人抱有感激之心，使学生的感恩情怀内化为良好的品德，从而形成健全的人格。学生懂得了“赠人玫瑰，留有余香”蕴含的感恩思想；领悟到“感恩”的深刻含义：“只有心怀感恩，才能滋润生命”的人生真谛！
2、教师的能力得到提高
教师通过对感恩教育与培养的研究，促使教师不断地学习相关理论，更新教育观念，促进教师的专业成长；使教师意识到科研对教学的促进作用，积极参加到教学科研中来；教师理论学习主动性将大大提高，并勇于把新理念体现在教学实践中，不断提高教师的自身素质。在课题完成之际，参与课题的教师根据自己亲身体会和经验总结，每人都完成了一片质量甚高的小学生感恩教育论文。这都为教师今后的进一步发展打下了良好的基础，促进我校的教师逐步走向科研型。
3、促进了学校教育、家庭教育、社会教育的协作沟通、和谐发展。
八、不足之处
感恩教育不但要体现在各个活动中，更应体现在我们日常的学科教学中，这一点我们有待加强。
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